六、免疫组化
免疫组化（IHC）是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。
流程:：
取材和组织固定；
切片；
脱蜡；
抗原修复；
血清封闭和抗体孵育；
DAB显色；
封片；
标本收集及注意事项：
石蜡切片：
*标本新鲜：一般在2h以内进行，超过2h，组织将有不同程度的自溶，其抗原或变性消失，或严重弥散。
*取材部位：除取病灶或含待检抗原部位外，还应取病灶与正常交界处，即所取组织切片中同时应有抗原阳性和阴性区，以形成自身对照。
*取材后的组织需立刻投于固定剂中固定使组织和细胞的蛋白质凝固，终止内源性或外源性酶反应，防止组织自溶或异溶，以保持原有结构和形态；对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活或弥散。
冰冻切片：
*液氮中冰冻：组织投入液氮中C)10-20sec°(-。
*干冰中加入丙酮(或异戊烷)，液体立即气化起泡，温度降至-70C，将组织投入，若在干冰丙酮中置一盛有异戊烷的容器，组织投入该容器内结冻则更好。
*上述组织在速冻时应浸埋于OCT包埋剂或甲基纤维素糊状液内，以保护组织。-制成冻块后若需保存，应以铝箔或塑料薄膜封包，贮存于-70C冰箱。
七、Masson染色
Masson染色主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。Masson染色是最为常用的结缔组织染色法，此法多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布，纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增生程度的差别具有重要价值。
流程：1、组织固定,切片,脱蜡至水
2、Masson复合染色液
3、醋酸水溶液洗涤
4、加入磷钨酸
5、醋酸水溶液浸洗
6、亮绿染色液染色
7、醋酸水溶液洗
8、无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片注意事项：1、控制好染色步骤。2、0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳。
八、HE染色
HE（Haematoxylinandeosin）染色。它是病理技术中最常用的一种方法，通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法，以达到准确，完整的病理诊断。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
内容流程：一般包含取材固定，脱水透明，浸蜡包埋，切片与贴片，脱蜡染色，脱水透明，封固等步骤。
1.包埋，切片，染色，拍照等
2.其他特殊染色，如普鲁士染色，Masson染色等等
九、免疫荧光
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质、定位，以及利用定量技术测定含量。
将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。
十、TUNEL检测
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现-bp的DNAladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。YuJinBio提供病理学实验服务！（一）
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