组织的取材和固定技术
知识点1
对送检组织标本的要求
送检组织标本在手术切除或活检后应当立即放入10%福尔马林中固定。尸检标本应当尽量在死亡后尽早取材固定。送检组织需要全部取材的,应当在送检单上注明,有特殊要求(如细菌培养、解释道化学分析等)应当事先联系,并且在标本未固定前进行处理。
知识点2
组织取材要求
在对送检组织标本进行详细检查的基础上,根据诊断的需要,确定取材的部位和块数。切取的组织应当按照不同的部位分别给予不同的编号或标记,以便镜检时核对。另外,尽可能在取材前对有意义的标本的表面及剖面镜下摄影,并编号存档。
知识点3
组织标本大小
组织标本大小见表
知识点4
组织取材时间
原则上,应当尽快取材,但对于外科手术切除标本较大,如胃、肺、肠等器官,一般最好先固定再取材。
知识点5
小标本的处理方式
由于在胃镜下取的样本和各种穿刺样本等一般组织块较小,因此应用易透水的薄纸包好,在取材时将标本染上伊红液,以免在包埋过程中丢失。
知识点6
成年人尸检组织取材部位和组织块数
成年人尸检组织取材部位和组织块数见表
知识点7
活检标本取材要求
活检标本取材时,应当取病变部位、病变的切缘、病变与正常组织交界处以及远离病灶的正常组织,取材时要避免挤压组织,用的刀、剪应锋利,组织的切面应当平整,大小一般在2cm×1.5cm×0.3cm。新鲜标本的保存通常在30分钟内完成,如果要进行分子生物学检测,应当严格注意无菌和时间,以避免组织内的mRNA的降解和抗原的弥散,手术标本离体后,应立即取材,并且保存在冻存管中,进行编号,带回实验室保存在液氮或-80℃的冰箱内备用。
知识点8
组织固定的目的
病理学中组织固定的主要目的是保存组织形态学特征清晰和稳定,具体包括:
①抑制自溶和腐败;
②保存;
③硬化;
④胶质物体的固化;
⑤肉眼鉴别;
⑥对染色的影响;
⑦渗透和固定。
知识点9
组织的物理固定方法
组织固定可通过物理方法来实现,见表
知识点10
组织脱钙
组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶,经过固定后,需要先将钙盐除去使组织软化,才能进行常规切片。如果脱钙不全,则切片容易撕开或碎裂,损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程,称为脱钙。骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间,但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。
知识点11
组织脱钙的步骤
组织脱钙的步骤见表
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