前言消化内镜标本的前世今生:病理科消化内镜标本的前世是在消化内镜室出生的,它从主人的身体里被挑选出来要经过一个复杂的专业过程,从开始准备做消化内镜到临床医师在内窥镜下的精挑细选、再到从体内取出、处理后进入标本瓶,一步一个脚印的来到了它的今生——病理科,从此开启了被剖析的开挂之路。
第一步
第一次确认身份——标本接收
标本千千万,身份只有一个。接收标本的时候要仔细核对申请单:姓名、性别、年龄、科室,住院号、门诊申请号,病史,内镜下表现,临床诊断,取材部位;标本浸泡在10%中性福尔马林中,瓶上的标本号及标本部位,与申请单一一对应。病理检查申请单是临床科室向病理科送达的会诊单,是病理医师作出病理诊断必备的临床文字资料,是具有法律意义的文书档案。因此,临床医师应认真逐项填写申请单内的有关项目,并由主管医师签名后随同检查标本送往病理科。
病理科在验收申请单及送检标本时,凡有下列情况之一者,病理科应及时作出处理,包括与送检科室联系或退回:
(1)申请单与送检标本不符,包括盛标本的容器上未贴标识者;
(2)申请单中有重要项目空缺未填写,或病史及临床检查(包括术中检查)过于简单者;(3)送检标本因未及时固定而致组织严重自溶、干缩、腐败,或被错误地使用非固定液(如消毒液等)浸泡者;
(4)如果送检标本患者为传染病患者时,请临床大夫务必在申请单上注明;
另外,如果是大标本送检,需要送完整的标本,避免切开送检。
对符合送检要求的标本,送检者在病理科标本接收本上登记签字确认,接收标本者在送检科室的标本送检簿上签收或发给收到标本回执。
图1胃镜标本及申请单第二步
病理新身份——登记
进入一个新家,要有一个新的身份:建立病理号。每一个标本都有唯一的病理号,与最后的病理报告号一致,同时录入或提取标本主人的详细信息包括姓名、性别、年龄、门诊号或住院号,地址、电话,科室,就诊医师,临床诊断,取材部位等。
图2病理登记工作台
第三步
第二次核对身份+改装——取材每一个标本的高矮胖瘦,颜色质地都不一样,要进行统一的处理,同时观察病变,这就到了取材这一步。如果是大标本需要提前剖开预处理,充分固定;小标本不需要预处理可以直接取材。首先取材医师描述标本的形状、大小、质地及特殊所见,然后统一处理后装入包埋盒。
取材是关键的一步,需要临床科室和病理科的配合。以内镜标本为例,内镜一般取粘膜层,形状是一个粘膜的平面,需要伸展开贴在滤纸上,这里就需要内镜医师在标本未固定的时候,把取下标本与滤纸贴合在一起,充分展开标本。如果未与滤纸贴合展开,标本容易在固定的时候边缘皱缩形成球形,影响后期包埋时辨认组织的方向。如不能立即伸展固定,先放入生理盐水(防止干燥)。每取出一块就放入生理盐水中,最好不要取出几块后再一起放。组织越小越易干燥皱缩,特别是食管标本,干燥的标本致染色性下降,难以辨认。浸泡在生理盐水中的组织也会发生自溶,小标本稍有组织自溶,结构就消失,最迟要在一个小时之内把切除的标本伸展后放入固定液中。
病理取材需要两名工作人员配合,一人在取材台取材同时口述肉眼所见,另一人在旁边电脑录入口述的标本取材的信息,同时再次核对标本瓶与申请单及电脑登记病理号三者的信息是否一致。
图3胃镜标本的取材
第四步
洗心革面——取材后固定、脱水、透明、浸蜡想要后期把标本做成“蜡像”,易于切片,就需要脱水。标本经过固定和取材时的冲洗后,组织中含有较多的水分,必须将组织块内的水分置换出来,这一过程叫做脱水。装入蜡块盒的内镜标本要在脱水机里进行从头到尾的洗心革面,在脱水机中固定后进入梯度酒精脱水,二甲苯媒介物透明,然后标本就和石蜡进行第一次亲密接触——浸蜡。
图4脱水机及内部的梯度溶液
第五步
包装——包埋
用包埋剂来支持组织的过程称包埋。标本和石蜡进行第二次亲密接触——石蜡包埋法。包埋的关键一是平整,二是方位。胃黏膜活检标本,不能按一般的规律取最大包埋面,应采取窄面竖起包埋。即从粘膜层至粘膜下层的方向包埋,做成蜡块。
图5包埋
第六步
深度瘦身——切片把2~3毫米厚的标本切成4~6微米的薄如蝉翼的蜡片也是很关键的一步。要切出一张无刀痕、裂隙,平坦,无皱褶、折叠,无污染、气泡,透明度好,对比清晰等病理切片质量评分≥90分的甲级切片,需要一定时间磨炼工,而且如果前期的工作没有做好,切片质量也会受到影响。真是牵一发而动全身。取蜡片置于水中,展片,然后捞在载玻片上,烤片。烤后的标本制成片白片。
图6切片第七步
精细装饰——脱蜡、染色、封片贴在玻片上的组织是无色的“素颜”,想要在显微镜下分辨并看清每一种细胞,需要给它们染上颜色。苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining)——简称HE染色法(苏木精和伊红更配哦),是石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。这样镜下细胞红蓝分明,非常美观。然后用盖玻片加中性树胶封片。
图7全自动染色机及HE染色镜下效果
第八步
闪亮登场——诊断
病理切片做好后,就在显微镜下闪亮登场了。
一般情况下,病理医师根据对病理诊断的把握程度而分为以下4种类型:(1)Ⅰ类:直接诊断。当病理医师对病理诊断有%的把握时,可直接签发诊断名称,如胃低分化腺癌等,这样的报告可信度高,临床医师收到此类报告可以直接采取相应的治疗措施。(2)Ⅱ类:意向诊断。当病理医师对疾病名称或病变性质不能完全肯定、对拟诊疾病名称或病变性质有所保留时,会在诊断名称前加“考虑”、“倾向于”、“符合”、“不除外”或“可能性大”等词语。这样的报告,临床医师需要根据病理诊断,结合自己掌握的实际临床情况,做出相应的诊断进行治疗;或者再进一步检查。如“低分化癌,倾向于腺癌”,表明“低分化癌”是肯定的,但“腺癌”是意向性诊断,需要进一步检查才能确诊。(3)Ⅲ类:描述性诊断。若送检组织不能满足对疾病或病变的诊断要求,如全为血凝块或坏死等情况,只能按照所观察到的形态进行描述。(4)Ⅳ类:无法诊断。当送检组织过小、破碎、固定不当、自溶、严重挤压、烧灼或干涸等,病变无法辨认,病理报告只能简要说明不能诊断的原因,这种情况只能是“建议必要时再次活检”。有些病理报告不是肯定性诊断,病理医师对此也是如梗在喉,但由于取材局限或病变复杂不得不发此类报告。
每一个诊断医师都是切片真人秀的评委,充分展现自己的标本,可以给直接诊断的Ⅰ类报告,举绿牌、通过;表现不够充分的标本,没有鲜明的个人特征,导致Ⅱ、Ⅲ类报告的,举红或黄牌,可以酌情附加建议(如建议密切随诊、随访或再次活检等),有些可以继续做免疫组化或分子检测追加才艺给再次展现自我的机会。对于诊断有争议的疑难标本,需要几位评委讨论给出综合意见。
图8病理医师工作站
第九步
出炉——报告发放
按部就班的像揭开锅的馒头一样的病理报告出炉了——对于作出诊断的标本,其诊断报告就可以录入电脑并审核、打印及签发。
图9病理报告示例SUMMER
这就是一份消化内镜标本在病理科的经历,真是步步惊心。其中还有很多的专业细节没有写出。从第一步到最后一步需要几乎病理科每个环节岗位人员的参与,其中任何一个环节的出错都会影响最后的报告,这样一条龙的服务欢迎各种类型的标本来享受。
end
后传
取材剩余标本保存至诊断报告发出后2周。文字资料和非文字资料(组织的石蜡包埋块、切片)等按规定的期限在病理档案资料管理室妥为保存,门诊患者为送检后15年,住院患者为送检后30年。期间HE切片可按有关规定办理借用手续;石蜡包埋块原则上不外借,可由病理科提供白片。
附:病理检查诊断流程示例
作者简介:李占稳,北医院病理科,医学硕士,主治医师,发表多篇学术论文,获得北京市吴秉铨病理学发展基金会优秀论文二等奖。
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